硬核利器 LyTARS™，高效搞定阻断抗体筛选

彩科生物 20260702

在抗体药物开发中，阻断抗体因其在肿瘤免疫治疗、感染性疾病及自身免疫性疾病治疗中的广泛应用而备受关注。然而，常规的ELISA或流式细胞术需要在96孔板中分多步完成，耗费大量人力物力，难以满足高效筛选的需求。

彩科生物建立了基于单细胞光导技术的单B细胞抗体筛选流程，设计了两轮筛选方案。首先通过一轮以受体微球为靶标的筛选，获得307个具有抗原结合活性的浆细胞。接着，通过一轮以荧光配体阻断效果为靶标的筛选，排除非特异性抗体，最终获得123个特异性阻断抗体。以上筛选过程保留了抗体的多样性，显著减少了后期抗体表达验证的工作量。

背景介绍

阻断型抗体是一类能够阻止配体与宿主细胞表面受体结合的抗体。它们通过特异性结合配体或者受体蛋白的关键位点，阻断配体与受体的相互作用，从而防止感染的发生或细胞信号的产生。阻断型抗体在肿瘤免疫治疗、感染性疾病防治及自身免疫性疾病的治疗中展现了巨大的应用潜力。例如，PD-1抑制剂（如Opdivo和Keytruda）通过阻断PD-1与其配体的结合，激活免疫系统攻击癌细胞；贝利尤单抗（Belimumab）通过阻断BLyS蛋白，调节免疫系统，治疗系统性红斑狼疮；罗泽利昔珠单抗（Rozanolixizumab）则用于治疗重症肌无力，通过阻断FcRn与IgG的结合，减少有害抗体的数量。然而，传统的抗体筛选方法，如杂交瘤技术和噬菌体展示技术，存在筛选库容量有限、筛选时间长、效率低等问题。这些方法通常需要分步进行ELISA或流式细胞术检测，且难以同步检测抗体的结合活性和阻断活性。使得阻断抗体筛选过程充满挑战。

上机筛选

彩科生物的研发人员在两张LyPartition™ 14K光导芯片上导入16524个浆细胞，先在Cy5荧光通道下通过一轮以Ag1受体微球为靶标的筛选获得307个有抗原结合活性的抗体，再在PE荧光通道下经过阻断活性筛选获得123个阻断抗体。随机表达的20株抗体中，17株抗体表达成功，其中11株的平衡解离常数（KD值）在100皮摩尔级，10株抗体的阻断活性IC50达到纳摩尔级，与阳性对照抗体在同一水平。

图 1 阻断活性检测示意图以及微腔在明场以及PE荧光视野下的检测结果：有阻断活性的阳性微腔底部无PE-配体结合所发出的荧光，而无阻断活性的阴性微腔底部仍有PE-配体结合后发出的荧光信号。

总结

随着阻断型抗体在肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病中的应用越来越广泛，科研人员对高效、精准的抗体筛选技术需求也不断增加。在本次实验中，彩科生物的研发人员在一天内利用LyTARS™平台完成了上万个浆细胞的筛选工作。通过两轮筛选，最终从结合阳性抗体中淘汰了近200个非阻断性抗体，获得123个特异性阻断抗体，极大降低了后续验证工作的工作量，缩小了筛选范围。相比其他单B方法的筛选流程还需要一个个候选抗体分子重组表达后进行阻断活性筛选，LyTARS™平台在效率方面的表现更为出色。

彩科生物自研的单细胞光导平台LyTARS™已经成功完成近100个小鼠抗体筛选项目和近50个兔抗及人外周血抗体筛选项目。筛选靶标涉及病毒刺突蛋白、小分子、短肽、核酸及GPCR膜蛋白等困难靶点。彩科生物不仅在阻断型抗体筛选assay开发方面取得了成功，还成功开发了多种其他抗体功能筛选assay，可以帮助科研工作者更加高效的进行抗体筛选工作。我们将持续更新最新的研发进展，欢迎大家持续关注。如有单B细胞抗体筛选需求，欢迎与彩科生物洽谈沟通。我们致力于为您提供高效、精准的科研设备和解决方案。

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彩科生物

彩科生物（Lychix）是一家成立于2018年的创新型高科技企业，由两位留美归国博士联合创立。公司专注于高端生命科学仪器与核心技术的自主研发，为生命科学提供先进研究工具，致力于开发高效的技术平台以挖掘高分辨率的海量生命科学数据。凭借突出的创新能力和明确的市场潜力，公司已获得IDG资本、君联资本等知名投资机构的支持，累计融资规模达数亿元人民币。公司主营业务聚焦于两大方向：高端生命科学和体外诊断（IVD）解决方案。

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